采用PCR-RFLP法鉴别IBDV强毒BC6/85株和弱毒B87株

作者：陈仕怡; 陈媛; 赖隆永; 李春燕; 刘梦茜; 袁晓琴; 郑庆礼; 许丽惠; 王全溪^*

来源：福建农林大学学报（自然科学版）, 2019, 48(03): 359-364.

DOI：10.13323/j.cnki.j.fafu(nat.sci.).2019.03.013

• 传染性法氏囊病病毒(IBDV)
• 限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)
• 限制性内切酶
• 鉴别诊断

选取传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒力代表株BC6/85和弱毒力代表株B87为研究对象,根据VP2基因保守区设计一对通用引物和两个限制性内切酶位点,分别扩增两个毒株的VP2基因,然后进行BamHⅠ和PstⅠ酶切,采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)分析酶切产物,并进行特异性、敏感性和重复性检测.结果表明:所设计的引物均可扩增两个毒株的VP2基因,大小约856 bp;经BamHⅠ和PstⅠ酶切后,BC6/85株的PCR产物被BamHⅠ和PstⅠ切出166、242和449 bp大小的3个片段,而B87株仅被PstⅠ切出242和615 bp大小的2个片段,且重复性好,特异性强.可见,采用PCR-RFLP分析IBDV VP2基因的方法操作简单,是一种能够快速鉴别IBDV强、弱毒株的可靠方法.

• 单位
  动物科学学院; 福建农林大学