2-卤代酸脱卤酶的表达优化

作者：王亚月; 董超群; 靳志远; 张萌萌; 裴冬丽^*

来源：商丘师范学院学报, 2022, 38(09): 46-49.

• 2-卤代酸脱卤酶
• 异源表达
• 优化

2-卤代酸脱卤酶是催化2-卤代酸脱卤产生相应2-羟基酸的一类酶，其水解脱卤能力和对映体选择性使其在环境修复与光学纯手性化合物绿色合成领域具有广阔应用前景.然而天然2-卤代酸脱卤酶产量通常很低，本文以分离自Pseudomonas putida PP3菌株的DL-2-卤代酸脱卤酶DehI为研究对象，构建DehI-pET28a重组质粒，在大肠杆菌中进行原核表达，并对其表达条件进行优化.经优化获得其最佳表达条件：当细胞OD600 nm为0.8,IPTG为0.2 mM,30℃诱导9 h时，活性蛋白量最高，为1.36 U/mL,与常用诱导条件相比提高7.5倍.本研究为2-卤代酸脱卤酶构效关系及其改造研究奠定基础.

• 单位
  商丘师范学院