红霉素联合顺铂对A549细胞的细胞周期和凋亡的影响

作者：甘罗曼; 黄斯明; 李文涛; 柳广南^*

来源：国际呼吸杂志, 2019, (04): 241-248.

• 红霉素
• 顺铂
• 细胞周期
• 细胞凋亡

目的 研究红霉素(EM)对顺铂(CDDP)诱导A549细胞周期的细胞凋亡作用的影响。方法 以A549细胞为研究对象,配制CDDP浓度为0.25、0.5、1、2、4、8 mg/L。用不同浓度CDDP刺激A549细胞48 h,采用Cell Counting Kit-8法检测不同浓度CDDP处理A549细胞后的细胞活性,并分别计算CDDP各自的半数抑制浓度(IC50)。将试验分组为空白对照组(只加10%灭活胎牛血清的RPMI-1640细胞培养液)、10 mg/L EM组、10 mg/L EM＋IC50-CDDP组、IC50-CDDP组,各组细胞培养48 h后,流式细胞仪检测各组细胞的凋亡、细胞周期百分比。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测HDAC2、Caspase-9、Caspase-3、cyclinD1 mRNA的表达；采用蛋白质印迹法检测HDAC2、Caspase-9、Caspase-3、cyclinD1蛋白的表达。结果 不同浓度CDDP处理A549细胞48 h,细胞生长受到不同程度抑制,并且呈浓度抑制依赖性,浓度越高,对细胞生长抑制作用越大(P<0.05)。IC50-CDDP为3.449 mg/L。流式细胞仪细胞周期结果显示：与空白对照组比较,其它3组细胞周期G0/G1期比列均增加,差异均有统计学意义(P值均<0.05),细胞凋亡结果显示：与空白对照组比较,10 mg/L EM组的细胞凋亡有增加,但差异无统计学意义(P>0.05),而10 mg/L EM＋IC50-CDDP组及IC50-CDDP组的细胞凋亡明显增加(P值均<0.05)。与空白对照组比较,10 mg/L EM组及10 mg/L EM＋IC50-CDDP组HDAC2、Caspase-9、Caspase-3 mRNA及蛋白表达均升高,cyclinD1 mRNA及蛋白的表达均下降,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论 EM可使A549细胞的cyclinD1的活性下降,增强CDDP对A549细胞的细胞阻滞作用。EM还可促进凋亡相关蛋白Caspase-9、Caspase-3表达增加,增强CDDP对A549细胞的凋亡作用,其机制可能与EM提高A549细胞的HDAC2表达有关。因此,可考虑将EM联合CDDP作为治疗肺腺癌患者的新型药物组合。

• 单位
  青海大学; 广西医科大学第一附属医院; 广西医科大学