大鼠HO-1基因慢病毒载体的构建与鉴定

作者：程轶; 周中新; 武维恒

来源：中华全科医学, 2013, (03): 338-340+499.

DOI：10.16766/j.cnki.issn.1674-4152.2013.03.001

• HO-1基因
• 慢病毒表达载体
• 缺血性心脏病 Heme oxygenase-1(HO-1) gene
• Lentiviral vector
• Ischemic heart disease

目的构建携带大鼠血红素加氧酶-1(HO-1)的慢病毒表达载体。方法构建HO-1基因表达质粒GV208-EGFP-HO-1,并进行测序鉴定。重组质粒GV208-EGFP-HO-1与两种辅助包装原件载体质粒通过Lipofectamine 2000共转染293T细胞,培养48 h后,收集细胞培养上清液,将病毒浓缩后测定病毒滴度。结果成功构建HO-1基因表达质粒GV208-EGFP-HO-1,转化感受态DH5ɑ大肠杆菌。挑阳性单克隆PCR得到1074 bp的特异性条带,测序结果与目标序列完全一致。将HO-1基因过表达载体质粒与另外两种辅助包装原件载体质粒共转染293T细胞后在荧光显微镜下发出明显绿色荧...

• 单位
  徐州医学院附属医院; 徐州医科大学