目的：通过对革兰染色液配方的改良，建立一种快速两步革兰染色法。方法：配制多种两步法革兰染色液，不断优化染色时间，建立一种快速两步革兰染色法，然后将其与临床快速四步革兰染色法染色结果进行比较。结果：两步法A液15s、B液10s染色效果好，分别用两步法、四步法各染100张涂片，其中两步法合格率为94%，四步法为87%。以合格率计算，二者结果经统计学分析无明显差异，两步法可以达到与现有临床快速四步法相同的染色效果。结论：本研究建立的两步革兰氏法能满足临床工作需要，可以用于临床。
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