马氏珠母贝α2-巨球蛋白受体结合区酵母双杂交系统的构建及自激活检测

作者：曹丹煜; 陈刚; **东; 汤保贵; 周晖; 施钢; 潘传豪; 黄建盛; 王忠良^*

来源：广东海洋大学学报, 2019, 39(01): 30-34.

• 马氏珠母贝
• α2-巨球蛋白
• 酵母双杂交
• 自激活检测

【目的】构建马氏珠母贝(Pinctada martensii)酵母双杂交文库及α2-巨球蛋白受体结合区诱饵载体,检测其在酵母细胞中的自激活作用。【方法】利用CLONTECH SMART技术及酵母体内同源重组的方法构建马氏珠母贝酵母双杂交cDNA文库;将α2-巨球蛋白受体结合区克隆至pGADT7载体,并转化AH109酵母感受态细胞,检测自激活作用。【结果与结论】酵母双杂交文库容量为1.11×107克隆/mL,重组率大于90%;菌落PCR结果显示,插入片段长度均在500bp以上;诱饵质粒成功转化至AH109菌株,且无自激活性,符合文库构建指标,可用于文库筛选。

• 单位
  广东海洋大学