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摘要
目的 研究一氧化氮(NO)对小鼠气道club祖细胞增殖功能的调控及可能代谢机制。方法 使用流式分选技术分选小鼠气道原代club祖细胞，经25μmol/L的NO供体二乙胺壬酸酯(DEA NONOate)处理后进行转录组测序；分选小鼠气道原代club祖细胞，使用肺脏类器官技术体外培养原代club祖细胞，分别加入正常培养基，40 nmol/L辛伐他汀(Hmgcr抑制剂)，0.2μmol/L 6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸(DON,Gmps抑制剂)，1 mmol/L氨基羟乙酸酯(AOA,Gpt2抑制剂)培养基，在培养第8天时使用倒置显微镜拍照，观察原代club祖细胞衍生类器官生长情况，并统计类器官直径和形成效率。结果 DEA NONOate处理原代club祖细胞转录组表达显著变化(上调倍数超过1.2倍的基因2 894个，下调16.7%以上的基因3 270个)，其中代谢相关基因Hmgcr、Gmps和Gpt2的表达量显著下降(P<0.01)。与对照组相比，辛伐他汀组原代club祖细胞形成的类器官直径减小(P<0.01)，类器官形成效率没有变化；DON组类器官直径减小(P<0.01)，类器官形成效率降低(P<0.01);AOA组类器官直径减小(P<0.01)，类器官形成效率降低(P<0.01)。结论 NO抑制小鼠气道原代club祖细胞增殖功能可能与其负调控Hmgcr、Gmps和Gpt2代谢相关通路有关。
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