siRNA干扰Notch1诱导肝癌细胞凋亡的机制研究

作者:向利军; 贺翊峰; 鲁才杰; 陈伟强; 郭亮; 季明芳
来源:湖南中医药大学学报, 2018, 38(03): 284-288.

摘要

目的研究Notch1在肝癌组织及细胞中的表达并初步探讨Notch1下调后诱导肝癌细胞调亡的机制。方法 2016年3月至2016年9月于广东医科大学附属医院肝胆外科收集32例肝癌病人样本,利用q RT-PCR方法检测肝癌癌组织及癌旁组织中Notch1基因的表达,免疫组化检测组织中Notch1蛋白表达,siRNA沉默肝癌细胞Notch1表达,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot方法检测Notch1、Bcl2和Bax蛋白表达,统计分析Notch1表达水平与肝癌病人临床诊断指标甲胎蛋白(AFP)的相关性。结果肝癌组织标本中Notch1高表达率为71.9%(23/32),明显高于癌旁组织的28.1%(9/32),差异具有显著统计学意义(P<0.01);Pearson相关性分析显示,Notch1与AFP存在正相关性(R2=0.3376,P=0.0036);免疫组化验证Notch1蛋白分别在肝癌癌组织样本中高表达和癌旁组织中低表达;siRNA干扰Notch1基因表达后,镜下发现肝癌细胞4401增殖抑制,流式检测示转染组明显凋亡,蛋白免疫印迹显示凋亡相关蛋白Bcl2蛋白下调、Bax表达上调。结论 Notch1与肝癌的发生、发展相关,下调Notch1可诱导肝癌细胞凋亡,同时Notch1还可作为临床治疗肝癌的潜在新靶点。