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摘要
近年来抗生素的不合理使用导致细菌耐药性问题逐渐加剧,开发新型有效的抗菌制剂迫在眉睫。噬菌体及其溶菌酶具有特异性强、抗菌效力强、安全性高、筛选周期短、绿色安全及不易产生耐药等优势,可作为一种天然抗菌剂防控细菌病。为了分析广宿主谱沙门菌噬菌体SHWT1的溶菌酶抑菌活性,本文将沙门菌裂解性噬菌体SHWT1的溶菌酶lys基因克隆至表达载体pET28a(+),然后转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,纯化后获得了大小19 kDa、浓度为2 mg/mL的高纯度融合蛋白LysSHWT1。平板裂解实验显示,溶菌酶重组蛋白LysSHWT1对鸡白痢沙门菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、鸡伤寒沙门菌具有较好的裂解活性,裂菌圈直径分别为16、13、14、13 mm,对照组无裂解圈;裂菌谱结果显示,LysSHWT1对101株临床沙门菌株中的60株菌株存在裂解作用,未发现能裂解除沙门菌外的其他菌株;进一步研究发现,溶菌酶在EDTA的协同作用下可以展现更好的抑菌活性,使鸡白痢沙门菌SP01、鸡伤寒沙门菌SG02、鼠伤寒沙门菌SAT52、肠炎沙门菌SE12滴度显著下降(P<0.05)。本研究表明广宿主谱沙门菌噬菌体溶菌酶LysSHWT1可有效裂解沙门菌,在防控沙门菌感染方面具有潜在的应用价值。
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