沉默TRPM2-AS对耐奥沙利铂的结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响及机制研究

作者：**; 吴丹心; 杜金凤

来源：重庆医学, 2022, 51(02): 192-203.

• 结直肠癌
• 瞬时受体电位通道M2反义RNA
• miR-22-3p
• 奥沙利铂
• 细胞增殖
• 凋亡

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)瞬时受体电位通道M2反义RNA(TRPM2-AS)对耐奥沙利铂(L-OHP)的结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响及可能机制。方法采用L-OHP浓度递增处理结直肠癌细胞HCT-8,获得L-OHP耐药细胞HCT-8/L-OHP,RT-qPCR法分别检测HCT-8和HCT-8/L-OHP细胞中TRPM2-AS与miR-22-3p表达。分别转染TRPM2-AS小干扰RNA、miR-22-3p模拟物,或共转染TRPM2-AS小干扰RNA与miR-22-3p抑制剂至HCT-8/L-OHP细胞,CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞cleaved-caspase3蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证TRPM2-AS和miR-22-3p调控关系。结果 HCT-8/L-OHP细胞中TRPM2-AS表达明显高于HCT-8细胞(P<0.05),而miR-22-3p表达明显低于HCT-8细胞(P<0.05)。沉默TRPM2-AS或过表达miR-22-3p后,HCT-8/L-OHP细胞OD48 h/72 h值和克隆形成数降低(P<0.05),而细胞凋亡率及cleaved-caspase3蛋白表达升高(P<0.05)。TRPM2-AS可靶向结合miR-22-3p,且沉默TRPM2-AS促进HCT-8/L-OHP细胞中miR-22-3p表达。抑制miR-22-3p逆转了沉默TRPM2-AS对HCT-8/L-OHP细胞增殖和凋亡的影响。结论沉默TRPM2-AS可能通过靶向上调miR-22-3p阻碍耐L-OHP的结直肠癌细胞增殖,并促进其凋亡,TRPM2-AS可能是逆转结直肠癌细胞耐L-OHP的分子靶点。

• 单位
  湖北省十堰市太和医院