同位素稀释液相色谱串联质谱测定血清糖化白蛋白

作者：周慧娟; 张天娇; 龙琪琛; 曾洁; 张江涛; 周伟燕; 张超; 张传宝^*

来源：中华检验医学杂志, 2020, 43(10): 984-989.

• 血清糖化白蛋白
• 同位素稀释液相色谱串联质谱
• 糖化赖氨酸

目的建立一种基于同位素稀释液相色谱串联质谱法(ID-LC/MS/MS)检测血清糖化白蛋白(GA)的准确定量方法。方法本研究在日本临床化学学会(JSCC)推荐的ID-LC/MS方法上进行优化, 采用阴离子交换色谱柱提纯白蛋白(Alb), 使用重量法准确称量提纯标本、赖氨酸(Lys)和糖化赖氨酸(DOF-Lys)的标准溶液及两种的混合内标, 将Alb酸水解为氨基酸, 检测Lys和DOF-Lys从而定值GA。根据C62-A文件对建立的方法进行方法学评价并与常规方法进行比对研究。结果蛋白电泳鉴定标本Alb纯度结果为100%。Lys和DOF-Lys线性标准曲线R2范围分别为0.997 8～0.999 9、0.999 4～1.000 0。血清GA测定的批内、批间和总的变异系数(CV)分别为0.69%～1.97%、1.13%～2.33%、1.37%～2.54%。正确度评价中三个浓度参考物质测定结果与认定值偏差分别为-2.56%、-1.87%、-2.94%。Lys和DOF-Lys的基质效应分别为89.92%、109.98%, 携带污染率分别为-1.13%、-3.27%。Lys的检测限和定量限分别为0.075、0.248 nmol/g, DOF-Lys的检测限和定量限分别为0.007、0.024 nmol/g。方法的相对扩展不确定度为1.60%～2.03%。与常规方法的拟合回归曲线R2为0.970 7。结论建立了一种基于ID-LC/MS/MS法检测血清GA的方法, 方法学评价准确可靠, 有望作为血清GA检测的候选参考方法。

• 单位
  中国医学科学院; 北京医院; 中国医学科学院北京协和医学院