摘要
本文通过测定Zeta电位、游离巯基含量、紫外光谱、荧光光谱、圆二色谱和蛋白质溶解性,研究不同缓冲体系【(磷酸盐缓冲液(PBS)、Tris-HCl缓冲液(Tris-HCl)、柠檬酸盐缓冲液(CBS)】下超高压处理对乳铁蛋白(LF)结构和理化性质的影响。结果表明:3种缓冲液中LF对超高压的抗性如下:CBS>Tris-HCl>PBS,即LF在PBS中的三级结构和溶解性最容易被超高压改变。缓冲溶液中阴离子的吸附能力导致LF的等电点发生变化;PBS、CBS、Tris-HCl 3种缓冲液中LF表面Zeta电位分别为-3.86~20.07,-6.89~19.6 mV和1.24~23.37 mV,因此阴离子的吸附能力CBS>PBS>Tris-HCl。pH 7的Tris-HCl缓冲液中600 MPa处理的LF产生大量沉淀,游离巯基含量达到最高,为6.23μmol/(L·g),蛋白溶解度最低,为45.28μg/mL。p H为3时LF的α-螺旋含量显著低于其它样品,无规卷曲含量显著高于其它样品,表明LF的二级结构在酸性条件下会变松弛,并且更容易受到高压的影响。
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