miR-186-5p调控NEK2表达对HL-60细胞阿霉素耐药性的影响

作者：周兰兰; 李铭杰; 关则兵; 朱秋花; 刘亚楠; 曾文彬; 邱石球; 高延民; 王宏

来源：山西医科大学学报, 2021, 52(10): 1272-1278.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2021.10.005

• miR-186-5p
• NEK2
• 阿霉素
• 耐药性

目的探讨miR-186-5p调控中心体相关激酶2（NEK2）表达对HL-60细胞阿霉素（ADR）耐药性的影响。方法依次用0.092,0.184,0.552,0.920μmol/L ADR反复培养HL-60细胞,最终获得在0.920μmol/L ADR稳定生长的细胞系,即为HL-60/ADR细胞系。以HL-60细胞、HL-60/ADR细胞为研究对象,CCK-8法检测细胞活力及IC50,qRT-PCR法测定细胞中miR-186-5p表达水平。将HL-60/ADR细胞分为对照组（正常培养）、miR-186-5p NC组（转染miR-186-5p阴性对照）、miR-186-5p mimic组（转染miR-186-5p mimic）、miR-186-5p mimic+NEK2 mimic组（共转染miR-186-5p mimic和NEK2 mimic）,qRT-PCR法测定各组HL-60/ADR细胞中miR-186-5p表达水平,CCK-8法检测各组HL-60/ADR细胞活力及IC50,Western blot法测定各组HL-60/ADR细胞中NEK2蛋白及耐药性蛋白抗P-蛋白（P-gp）、抗谷胱甘肽S-转移酶π（GST-π）表达水平,荧光素酶报告实验检测miR-186-5p与NEK2的靶向关系。结果与HL-60细胞相比,HL-60/ADR细胞中miR-186-5p表达水平显著降低（P50值升高（P50值、P-gp、GST-π蛋白比较差异无统计学意义（P>0.05）;miR-186-5p mimic组HL-60/ADR细胞中miR-186-5p表达显著升高（P50值、P-gp、GST-π蛋白显著降低（P50值、P-gp、GST-π蛋白显著升高（P<0.05）。荧光素酶报告实验结果显示miR-186-5p与NEK2 mRNA存在靶向关系。结论上调miR-186-5p可降低HL-60/ADR细胞的ADR耐药性,可能是通过抑制NEK2表达实现的。

• 单位
  广东药科大学附属第一医院