宫颈及宫颈癌间质成纤维细胞的分离、鉴定与衰老检测研究

作者：陈玮; 陈亚萍; 杨恭

来源：中国癌症杂志, 2014, 24(04): 258-265.

• 宫颈癌
• 间质成纤维细胞
• 细胞衰老
• 上皮肿瘤细胞

背景与目的:宫颈癌作为最常见的妇科恶性肿瘤之一,近年来发病呈年轻化趋势。目前认为人类乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)的感染,特别是高危型HPV感染是其发生的主要因素。已有研究证实,在肿瘤发生的微环境中,间质成纤维细胞衰老可能促进上皮性肿瘤的发生,但宫颈癌的发生是否也伴有间质成纤维细胞的衰老鲜见报道。本研究拟对正常宫颈和宫颈癌间质成纤维细胞进行特异性研究,以揭示慢性炎症诱导宫颈癌发生的机制,旨在为宫颈癌的诊治提供新的理论依据。方法:分离纯化正常宫颈成纤维细胞(normal fi broblasts,NFs)和宫颈癌相关成纤维细胞(cancer-associated fi broblasts,CAFs),通过ELISA法检测细胞因子白介素-6(interleukin-6,IL-6)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的分泌水平;并用衰老相关β-半乳糖甘酶染色(senescence-associatedβ-galactosidas e,SA-β-gal)、细胞计数和蛋白质印记法(Western blot)分别鉴定细胞衰老、绘制细胞生长曲线和检测NFs与CAFs中p16蛋白表达。结果:CAFs分泌的细胞因子IL-6和VEGF比NFs高2倍以上(P<0.05);CAFs中SA-β-gal的活性比NFs高;而CAFs中p16水平的表达水平比NFs中高。结论:间质成纤维细胞衰老可能与宫颈癌的发生和HPV密切相关,研究细胞因子介导的宫颈癌间质衰老可能有助于宫颈癌的预防、诊断和治疗。

• 单位
  复旦大学附属肿瘤医院; 中心实验室; 复旦大学; 上海市第五人民医院