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摘要
目的:研究片仔癀(PZH)体外对长链非编码RNA-ANRIL(LncRNA-ANRIL)介导大肠癌淋巴管新生的抑制作用及其机制。方法:将体外培养人大肠癌细胞HCT-116用PZH进行干预,分为对照组和PZH干预组(0.25、0.50、0.75 mg/mL),采用CCK-8实验检测细胞活力,用RT-qPCR检测LncRNA-ANRIL的表达,用Western blot法检测促淋巴管新生因子VEGF-C蛋白表达;用Lipofectamine RNAiMAX转染HCT-116细胞,分为Si-NC组和Si-ANRIL组,采用RT-qPCR法检测LncRNA-ANRIL的表达,在倒置显微镜下观察细胞形态变化,用CCK-8实验检测细胞活力,Western blot检测促淋巴管新生因子VEGF-C蛋白表达;分别以Si-NC、Si-ANRIL和Si-NC+PZH(0.25 mg/mL)干预HCT-116细胞并收集细胞培养上清液即肿瘤培养上清(TSNs)用于培养人淋巴内皮细胞(HLEC),采用CCK-8实验检测细胞活力,Transwell实验观察细胞迁移能力和细胞侵袭能力,管腔形成实验观察细胞管腔形成能力。结果:不同浓度PZH干预HCT-116细胞均可显著抑制其活力(P<0.01),下调LncRNA-ANRIL表达(P<0.01)和VEGF-C蛋白表达,呈浓度依赖性;在HCT-116细胞中沉默LncRNA-ANRIL的表达,与Si-NC组比较,Si-ANRIL组LncRNA-ANRIL表达显著降低(P<0.05),且可降低细胞密度、细胞活力(P<0.01)和VEGF-C蛋白表达;收集的TSNs上清干预HLEC后,与Si-NC组比较,Si-ANRIL和Si-NC+PZH(0.25 mg/mL)组可显著降低HLEC活力、迁移能力、侵袭能力和管腔形成能力(P<0.01)。结论:PZH可抑制大肠癌细胞LncRNA-ANRIL表达及其介导的大肠癌淋巴管新生,LncRNA-ANRIL是PZH抑制大肠癌淋巴管新生的作用靶点之一。
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