HNF1α基因克隆在不同分化程度胰腺癌细胞系中的表达

作者：罗招凡; 郑上游; 赵书琴; 温玉苑

来源：热带医学杂志, 2018, 18(08): 1010-1013.

• 胰腺癌
• HNF1α基因
• 重组质粒

目的克隆人胰腺癌相关易感基因HNF1α,并通过检测三种不同胰腺癌细胞系中HNF1α的表达,筛选出HNF1α低表达的胰腺癌细胞系,为进一步研究提供依据。方法提取Bx PC-3,PANC-1及SW-1990胰腺癌细胞系的总RNA,用RT-PCR方法扩增HNF1α基因,PCR产物及pc DNA3.1(+)经Eco R I/Xho I双酶切后,用T4 DNA连接酶连接,连接产物转化细菌后挑选克隆,进行测序鉴定。通过Real-time PCR及Western blot方法比较HNF1αm RNA及蛋白在不同胰腺癌细胞系中的表达量。结果克隆得到了1 914 bp的HNF1α基因c DNA序列,与已发表的HNF1α同源性为99%。Bx PC-3,PANC-1及SW-1990细胞HNF1αm RNA相对表达量分别为(6.52±1.11),(3.09±0.54)及1,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot法检测HNF1α蛋白表达水平显示,在SW-1990细胞中HNF1α蛋白有少量表达,而在PANC-1,Bx PC-3细胞系中HNF1α蛋白表达依次增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HNF1α表达水平与胰腺癌细胞分化程度呈明显正相关,HNF1αm RNA及蛋白在SW-1990细胞系中均呈低表达,因此该细胞系可作为良好的研究工具,为进一步将HNF1α转染该细胞系,以研究HNF1α对胰腺癌的抑癌作用提供依据。

• 单位
  中山大学; 中山大学孙逸仙纪念医院