FADDdel-GFP真核表达载体的构建及其抗细胞毒效应初步观察

作者：胡萍; 王国华; 朱晓华; 虞涛; 朱慧芬; 杨敬; 张玮; 殷焦; 徐子辉; 刘晓; 徐芬; 沈关心; 龚非力

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2005, (03): 36-39.

• Fas相关结构域蛋白
• 凋亡
• 小鼠胰岛瘤细胞(NIT)
• 转染

目的　构建融合蛋白FADDdel GFP真核表达载体 pFADDdel GFP ,用该融合基因转染小鼠胰岛瘤细胞 (NIT) ,从而抑制死亡受体介导的细胞内凋亡信号传导 ,以探讨IDDM的发病机制及防治措施。方法　采用基因重组技术将FADDdel定向连接于真核表达载体 pEGFP N1 ,用脂质体将重组子pFADDdel GFP导入哺乳动物细胞NIT并检测其表达 ,采用FACS和MTT法检测特异性T细胞对转染重组子NIT引起的细胞毒效应。结果　转染重组子 pFADDdel GFP的NIT可见绿色荧光蛋白表达 ;pFADDdel GFP转染的NIT对特异性T细胞介导的细胞毒有明显抵抗。结论　成功构建 pFADDdel GFP融合基因并获稳定表达 ;pFADDdel GFP转染NIT可有效抑制死亡受体介导的细胞内凋亡信号传导。

• 单位
  井冈山学院; 华中科技大学同济医学院; 湖北大学