摘要

目的探讨卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)对哮喘小鼠淋巴细胞CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg细胞)数量及功能的影响。方法选择Balb/c小鼠,以卵白蛋白致敏激发建立小鼠哮喘模型,分为对照组、哮喘组、BCG-PSN干预组。BCG-PSN剂量为20 μg/只,体积为60 μl,在致敏前7 d腹腔注射干预,对照组同时给予相同剂量的生理盐水作对照,末次激发后48 h对小鼠进行有创肺功能检测,以乙酰甲胆碱各浓度激发时肺阻力(RL)表示。并收集支气管肺泡灌洗液(BALF),涂片后HE染色,计数其中的嗜酸粒细胞(EOS),取各组小鼠脾脏淋巴细胞,体外培养72 h后流式细胞仪检测CD4+CD25+Treg细胞/CD4+T细胞,Real-time PCR检测脾脏淋巴细胞foxp3及CTLA-4基因的表达量,酶联免疫吸附试验法检测脾脏淋巴细胞上清液中白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子β(TGF-β)的含量。结果 (1)BCG-PSN干预可明显降低哮喘小鼠的气道反应性和气道炎症。(2)哮喘组CD4+CD25+Treg细胞/CD4+T细胞比例(3.71±2.20)%明显低于正常组(6.44±1.16)%(P<0.01),BCG-PSN组(6.75±1.63)%与哮喘组相比差异有统计学意义(P<0.01)。(3)哮喘组小鼠脾脏淋巴细胞foxp3 mRNA、CTLA-4 mRNA的表达量明显低于正常组,BCG-PSN干预可显著提高foxp3 mRNA、CTLA-4 mRNA的表达。(4)哮喘小鼠脾脏淋巴细胞上清中IL-10、TGF-β的含量明显少于正常组。BCG-PSN组IL-10含量为(210.32±88.23) ng/L,显著高于哮喘组(114.41±73.58) ng/L(P<0.05)。BCG-PSN组TGF-β含量为(487.66±32.57) ng/L,显著高于哮喘组(97.76±23.58) ng/L(P<0.01)。结论 BCG-PSN可增加CD4+CD25+Treg细胞数量及功能,具体机制可能通过促进IL-10、TGF-β等抑制性细胞因子的分泌,及CTLA-4介导的细胞-细胞接触抑制机制诱导免疫耐受,从而降低哮喘小鼠的气道反应性和气道炎症。