猪流行性腹泻病毒RT-LAMP检测方法的建立与应用

作者：吴迪; 王林; 栗云鹏; 杜鹃; 张玮; 张启龙; 高晓龙; 程汝佳; 王培; 李蕊; 吴惠明; 宋彦军; 韦海涛; 周德刚^*

来源：中国兽药杂志, 2020, 54(05): 1-9.

• LAMP
• 猪流行性腹泻病毒
• 快速检测
• 检测方法

为建立一种适用于现场快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,针对猪流行性腹泻病毒(PEDV)的M基因编码区序列,分别设计合成3组引物,通过对引物的筛选和反应条件优化,建立了PEDV RT-LAMP可视化快速检测方法。灵敏度和特异性试验结果显示,本方法在65℃45 min对PEDV的检测灵敏度为2 copies/μL,与猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒均无交叉反应。利用该方法对30份送检的临床样品进行检测,检出阳性样品8份,与荧光定量RT-PCR检测结果一致。试验表明,所建立的RT-LAMP检测方法具有特异性好、灵敏度高、快速、结果可视、设备适用范围广等优点,适用于PEDV现场快速检测。