H1N1流感病毒HA蛋白疫苗构建策略的筛选

作者：郑宁晨; 杨姣姣; 张婷; 王志荣; 许雪梅^*

来源：基础医学与临床, 2022, 42(12): 1885-1890.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2022.12.1885

• H1N1
• 血凝素(HA)
• 基质蛋白(M1)
• 病毒样颗粒(VLP)

目的 筛选并确立流感病毒H1N1 A/Nebraska/14/2019血凝素(HA)的最佳蛋白疫苗策略。方法 分别构建HA全长、HA胞外区C端不同的突变体及共表达HA/M1的重组杆状病毒，感染昆虫细胞表达80 h后，收取培养上清，Western blot鉴定重组抗原的表达，同时采用血凝试验间接分析其免疫原性。然后大量表达HA/M1蛋白，Core700纯化后分析蛋白颗粒的理化性质、血凝活性及稳定性。结果 2种HA胞外区的C端突变体虽均以三聚体形式表达，但表达上清无血凝活性；HA全长三聚体具有较好的血凝活性，但为膜蛋白，纯化难度大。HA/M1共表达上清具有血凝活性，HA/M1表达上清经Core700纯化，透射电子显微镜分析显示为80 nm～150 nm病毒样颗粒(VLP)。HA-M1-VLP的血凝效价高达26,动态光散射显示HA-M1-VLP在4℃保存3个月性质稳定。结论 HA-M1-VLP易于表达纯化、稳定性好，且血凝活性高，可用于流感病毒H1N1蛋白疫苗的研究。

• 单位
  中国医学科学院基础医学研究所; 北京协和医学院