对硫磷纳米抗体筛选及分子识别机制研究

作者：张玉琪; 张瑾如; 王锋; 李家冬; 司睿; 吕丽珊; 沈玉栋^*; 王弘^*; HAMMOCK Bruce D; 孙远明

来源：Chinese Journal of Analytical Chemistry, 2019, 47(09): 1419-1428.

DOI：10.19756/j.issn.0253-3820.181772

• 纳米抗体
• 对硫磷
• 噬菌体展示
• 分子模拟

对硫磷是一种广谱的有机磷酸酯类杀虫、杀螨剂,毒性极强,可对环境和人类健康造成严重危害。尽管我国已禁止使用对硫磷,但仍存在违禁使用现象,加强对其监测十分必要。纳米抗体是已知最小的与抗原结合的片段(15 kDa),来源于骆驼科动物体内重链抗体的可变区,具有稳定性强、灵敏度高、易表达、水溶性好等特性。本研究基于噬菌体展示技术构建了抗对硫磷纳米抗体库,其库容为2.41×107 cfu/mL,经抗原-抗体固相亲和筛选及噬菌体酶联免疫法(Phage ELISA)鉴定,获得5种抗对硫磷纳米抗体VHH1、VHH6、VHH13、VHH21和VHH24。以结合能力最强的VHH1为基础,采用同源建模和分子对接技术探讨VHH1与对硫磷分子的识别机制,发现VHH1与对硫磷存在氢键和疏水间分子作用力,关键氨基酸是Ser60、Lys104、Phe105、Gly106和Arg107。本研究为抗体的进化改造和半抗原的设计提供了新思路。

• 单位
  华南农业大学; 广州安诺科技股份有限公司