基于cpsA基因的海豚链球菌LAMP检测方法的建立

作者：孙国荣; 马少鸿; 林桂香; 万小菊; 黄郁葱; 简纪常; 蔡双虎^*

来源：上海海洋大学学报, 2023, 32(01): 31-39.

• 海豚链球菌cpsA
• LAMP
• 可视化检测

基于荚膜多糖cpsA基因设计引物，建立海豚链球菌可视化环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP)技术，以快速检测鱼类养殖中的海豚链球菌。结果表明，LAMP最佳反应条件为65℃反应20 min,镁离子浓度为1.2 mmol/L、dNTPs浓度为0.64 mmol/L、内外引物比例为16∶1。特异性检测结果表明：该方法能特异性检出海豚链球菌，对无乳链球菌和其他14种菌检测结果均呈阴性；灵敏度检测结果表明，该LAMP方法灵敏度为2.12×10-5 ng/μL,比PCR检测方法灵敏度高100倍；适用性分析结果表明，该LAMP方法在模板中存在鱼类基因组干扰下也能正确完成检测。研究中建立的LAMP检测方法为海豚链球菌的检测提供一种可视化、灵敏、成本低的快速检测技术。

• 单位
  广东海洋大学; 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室