类固醇受体辅活化子-3基因敲除小鼠的繁殖与鉴定

作者：李军; 粟永萍; 王军平; 艾国平; 刘合年

来源：西南国防医药, 2009, 19(07): 667-669.

• 类固醇受体辅活化子-3
• 基因敲除
• 杂交

目的:繁殖并鉴定类固醇受体辅活化子(steroid receptor coactivator,SRC)-3基因敲除(SRC-3-/-)小鼠。方法:通过SRC-3-/-雄性小鼠与杂合子(SRC-3+/-)雌鼠杂交,繁殖出SRC-3+/-及SRC-3-/-两种基因型,提取每只小鼠尾部基因组DNA,用PCR法进行鉴定,并进一步提取肝、脾组织总蛋白,采用Western blot进行蛋白表型鉴定。结果:成功繁殖并准确鉴定出更多数目的SRC-3-/-小鼠。SRC-3+/+小鼠脾组织SRC-3蛋白表达水平显著高于肝组织,而SRC-3-/-小鼠的肝、脾组织均未见SRC-3蛋白表达。结论:雄性基因敲除小鼠与雌性杂合子杂交是获取大量SRC-3-/-小鼠的有效途径,PCR法是其子代简单准确的鉴定方法。

• 单位
  第三军医大学; 创伤、烧伤与复合伤研究国家重点实验室; 中国人民解放军成都军区总医院