血栓闭塞性脉管炎患者血浆源性外泌体miR-223-5p对人血管平滑肌细胞的影响

作者：陈波; 林学广; 邓颖; 王博; 童进东; 余波; 史卫军; 汤敬东^*

来源：复旦学报(医学版), 2022, 49(05): 677-689.

• 血浆外泌体
• miRNA
• 血管平滑肌细胞(HVSMC)
• 生物信息学
• 血栓闭塞性脉管炎(TAO)

目的 探究血栓闭塞性脉管炎（thromboangiitis obliterans,TAO）患者血浆源性外泌体中miRNAs对人血管平滑肌细胞（human vascular smooth muscle cell,HVSMC）的影响。方法 从TAO患者和健康对照的血浆中提纯外泌体，进行miRNA测序。通过生物信息学分析鉴定差异表达的miRNA(differentially expressed miRNA,DEmiRNA)，用RT-qPCR进一步验证。将PKH67荧光标记的外泌体与HVSMC共培养，采用CCK-8法和流式细胞术分别检测HVSMC的细胞活力和凋亡。使用双荧光素酶报告分析并确认miR-223-5p的下游靶点。结果 在TAO患者和健康对照之间共发现39个DE-miRNA，其中miR-223-5p是显著上调的miRNA。TAO患者血浆外泌体或miR-223-5p模拟物能降低HVSMC的细胞活力并促进细胞凋亡，miR-223-5p抑制剂可削弱TAO患者血浆源性外泌体的抑制和促凋亡作用。血管内皮细胞黏附分子1(vascular endothelial cell adhesion molecule-1,VCAM-1)和胰岛素样生长因子1受体（insulin-like growth factor-1 receptor,IGF-1R）的表达被TAO患者血浆源性外泌体和miR-223-5p模拟物下调，这一下调作用可被miR-223-5p抑制剂所抑制。双荧光素酶报告提示VCAM-1是miR-223-5p的靶点。结论 TAO患者血浆源性外泌体可能通过miR-223-5p/VCAM-1途径抑制HVSMC的细胞活力并促进细胞凋亡，从而在TAO的发生发展中起作用。

• 单位
  复旦大学附属浦东医院; 复旦大学附属华山医院; 上海市浦东医院