摘要

目的:对体外培养不同代数流产胎儿骨髓间充质干细胞(bone m arrow m esenchym al stem cells,MSCs)的人类白细胞抗原Ⅰ类(hum an leukocyte antigen,HLAⅠ-)和HLAⅡ-类抗原表达情况以及经过不同浓度干扰素γ(IFN-γ)作用后HLAⅠ-类和HLAⅡ-类抗原的表达变化进行观察,为建立干细胞库进行细胞移植提供体外实验证据。本研究经北京大学医学部伦理委员会批准。方法:胎儿MSCs取自23~24周流产胎儿,体外培养后取第5和第12代的细胞,流式细胞仪分析HLAⅠ-类和HLAⅡ-类抗原的表达水平。经过终质量浓度为5μg/L或50μg/L的IFNγ-处理后,于24,48,72,96,120 h检测HLAⅠ-类和HLAⅡ-类抗原的表达;并用RT-PCR方法定性分析第13代细胞HLA-E和HLA-G的mRNA表达。结果:胎儿骨髓MSC表达HLAⅠ-类抗原,几乎不表达HLAⅡ-类抗原。IFNγ-可以上调MSCs的HLAⅠ-类和HLAⅡ-类抗原。流式细胞分析显示HLAⅠ-类抗原阳性细胞占总细胞的比例超过50%,但HLAⅡ-类抗原阳性细胞不到10%。经过50μg/L的IFNγ-处理后,第5代细胞HLAⅠ-类抗原阳性细胞百分率及荧光强度与未经处理的细胞相比明显增加,且荧光强度随时间延长呈现递增趋势。第12代细胞HLAⅠ-类抗原阳性细胞百分率及荧光强度的上调幅度明显低于第5代细胞。相同浓度IFNγ-(50μg/L)作用于第5代和第12代细胞均可上调HLAⅡ-类抗原,第5代细胞于48 h开始上调(59.9%),第12代细胞于72 h开始上调(48.1%)。第12代细胞HLAⅡ-类抗原上调幅度低于第5代细胞。不同浓度IFNγ-(5μg/L和50μg/L)处理后,HLAⅠ-类抗原和HLAⅡ-类抗原阳性细胞百分率均明显增加。RT-PCR结果显示,胎儿骨髓MSCs有HLA-E和HLA-G抗原的mRNA水平表达。结论:胎儿骨髓MSCs可以被IFNγ-诱导上调HLAⅠ-类和HLAⅡ-类抗原表达。体外培养传代能减低IFNγ-作用后的抗原上调幅度。胎儿骨髓MSCs具有HLA-E和HLA-G抗原的mRNA的表达。