非洲猪瘟病毒多基因家族成员MGF360-12L RPA检测方法的建立

作者：吴映彤; 王西西; 吴竞; 陈鸿军; 朱鸿飞; 郭晓宇^*

来源：中国动物传染病学报, 2020, 28(02): 20-25.

• 非洲猪瘟病毒
• MGF360-12L
• RPA

为建立一种简便、快速的针对非洲猪瘟病毒(ASFV)多基因家族成员MGF360-12L的分子检测方法,基于MGF360-12L基因序列,设计并合成引物,建立重组酶聚合酶扩增(RPA)等温检测方法。结果表明,于35℃恒温反应30 min,即可实现对目的片段的稳定扩增;以含有MGF360-12L基因的重组质粒为模板,RPA反应的检测限达到103个拷贝,同普通PCR方法检测限一致;此外,该RPA方法仅特异性扩增非洲猪瘟病毒MGF360-12L基因,对PEDV、FMDV、CSFV、PRRSV、PRV 和 PCV-2基因组cDNA或DNA没有扩增。本研究建立的RPA方法操作简单、反应快速、检测成本低,能够为ASFV相关基因缺失毒株的鉴别诊断提供一定技术支持。

• 单位
  中国农业科学院上海兽医研究所; 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所