NMN转移酶和乙醇脱氢酶共固定化及其动力学特性

作者：余带兵; 李红梅^*; 杨娟; 高露姣; 孙十凡

来源：精细化工, 2019, 36(07): 1346-1351.

DOI：10.13550/j.jxhg.20180749

• NADH
• 磁性纳米颗粒
• NMN转移酶
• 乙醇脱氢酶
• 共固定化
• 生物工程

采用磁性纳米颗粒对烟酰胺单核苷酸(NMN)转移酶和乙醇脱氢酶进行共价共固定,用以生产NADH(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸),并对共固定化条件、共固定化双酶酶学性质及其动力学进行了考察。结果显示:双酶最佳共固定化反应条件为:NMN转移酶和乙醇脱氢酶添加量分别为6.5U/mg和10.3U/mg,体系pH控制在5.0～7.0,25℃固定化2 h,NADH产率可达到87%,与游离酶的催化产率73%相比提高了14%。所得共固定化双酶在连续使用11次后,剩余酶活仍保留在61.1%左右,表明共固定化酶具有较好的操作稳定性。双酶动力学方程推导与验证结果表明:共固定化双酶反应体系符合米氏方程,其动力学反应速率取决于固定化乙醇脱氢酶的反应速率。

• 单位
  中国水产科学研究院东海水产研究所; 上海理工大学