摘要
目的 比较香烟烟雾(cigarette smoke, CS)、肺炎克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae,KP)和CS联合KP(CS+KP)三种方法建立的慢性阻塞性肺疾病(COPD)小鼠模型肺小血管重塑变化,为进一步研究提供依据。方法 将72只雄性小鼠随机分为正常组(Normal组)、细菌组(KP组)、香烟烟雾组(CS组)、香烟烟雾联合细菌组(CS+KP组),每组18只。CS组采用CS暴露(3000±500 ppm),KP组采用KP稀释液(5×109 CFU/L,每7 d一次)滴鼻,CS+KP组给予联合处理,Normal组给予生理盐水滴鼻,共8周。停止刺激后观察至第16周,分别于第4、8、16周结束后取材。检测肺功能呼气中期流速(50%expiratory flow, EF50)、潮气量(tidal volume, TV),观察肺组织病理及肺小血管结构,包括管壁厚度百分比(WT%)、管腔面积百分比(LA%)和管壁面积百分比(WA%)变化,免疫组化法检测肺组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)表达。结果 与Normal组比较,CS组TV第8~12周降低,EF50第8~16周降低(P<0.05),WT%第8~16周升高,WA%及VEGF蛋白表达仅第8周升高、LA%仅第8周降低(P<0.05);KP组肺功能无显著变化,WT%仅第8周升高,LA%第8周降低(P<0.05);CS+KP组TV第4~12周降低,EF50第8~16周降低(P<0.05),WT%、WA%、VEGF蛋白表达在第4~16周升高,LA%第4~16周降低(P<0.05)。与CS组比较,CS+KP组WT%及VEGF蛋白表达第8~16周升高,WA%第16周升高,LA%第16周降低(P<0.05)。与KP组比较,CS+KP组WT%、WA%及VEGF表达第8~16周升高,LA%第4~16周降低(P<0.05);CS组WT%第8周升高、LA%第8周降低,VEGF蛋白表达第16周升高(P<0.05)。结论 CS、KP及其联合刺激8周小鼠均出现肺泡破裂、炎性细胞浸润、肺血管重塑等COPD病理特征,但各有特点:CS组第8周出现肺功能下降、肺泡结构断裂融合增厚,并在第16周仍存在,但肺血管重塑仅第8周明显;KP组肺功能下降不明显,肺组织炎症细胞浸润明显并持续存在,肺泡结构改变及肺血管重塑仅第8周存在;CS+KP组第4周即出现肺功能下降、肺泡结构的破坏及肺血管重塑,第16周仍持续存在。
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