表达O型口蹄疫病毒VP1基因的重组病毒BHV-1的构建与鉴定

作者：任宪刚; 薛飞; 朱远茂; 童光志; 王延辉; 冯军科; 祖立闯; 李娇; 史鸿飞; 高欲燃

来源：微生物学报, 2009, (05): 678-683.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.2009.05.017

• 口蹄疫病毒
• VP1基因
• 牛疱疹病毒1型
• 磷酸钙介导转染 FMDV
• VP1 gene
• bovine hepervirus-1
• calcium phosphate-mediated transfection

【目的】为了构建表达口蹄疫病毒(O/China/99)VP1基因的牛疱疹病毒1型,将人工合成的口蹄疫病毒VP1基因插入到巨细胞病毒(CMV)启动子之下构建gE基因缺失转移载体。【方法】利用磷酸钙介导转染法将该转移载体与亲本病毒BHV-1/gE-/LacZ+的基因组DNA共转染牛鼻甲细胞后收获增殖的病毒。通过筛选白色病毒蚀斑,得到重组病毒BHV-1/gE-/VP1。【结果】PCR检测结果表明VP1基因已经插入到了重组病毒BHV-1/gE-的基因组中,间接免疫荧光试验和Western blot证实了BHV-1/gE-/VP1中的VP1基因在感染的细胞中获得了表达。【结论】本研究成功地构建了表达口蹄...

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所