HPLC法测定二甲双胍格列本脲片(Ⅱ)中格列本脲的有关物质

作者：史芳; 连亚飞; 秦甲

来源：药物分析杂志, 2019, 39(11): 2051-2058.

DOI：10.16155/j.0254-1793.2019.11.18

• 二甲双胍格列本脲片
• 复方制剂
• 格列本脲
• 有关物质
• 高效液相色谱法

目的:建立HPLC法测定二甲双胍格列本脲片(Ⅱ)中格列本脲的有关物质。方法:色谱柱为C8柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为pH 3.5的磷酸二氢铵溶液(取磷酸二氢铵1.725 g,加水300 mL溶解,用磷酸调节pH至3.5±0.05),流动相B为乙腈,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,柱温为40℃,检测波长为230 nm。结果:格列本脲与已知杂质及强制破坏产生的降解产物均分离良好;格列本脲杂质Ⅰ、格列本脲杂质Ⅱ、格列本脲杂质B、格列本脲杂质C、格列本脲杂质D、格列本脲杂质E和格列本脲的定量下限分别为0.037、0.016、0.021、0.074、0.049、0.073和0.049μg·mL-1,检测下限分别为0.011、0.004 7、0.006 2、0.022、0.015、0.022和0.015μg·mL-1;格列本脲杂质Ⅰ、Ⅱ、B、C、D、E和格列本脲的质量浓度分别在0.037 43～2.245 5μg·mL-1(r=0.999 9)、0.015 62～0.780 8μg·mL-1(r=1.000)、0.020 76～0.778 5μg·mL-1(r=1.000)、0.073 69～0.736 9μg·mL-1(r=0.999 9)、0.049 30～0.739 5μg·mL-1(r=0.999 9)、0.073 28～0.732 8μg·mL-1(r=0.999 9)和0.051 49～0.386 2μg·mL-1(r=0.999 7)范围内与峰面积呈良好的线性关系;杂质Ⅰ、Ⅱ、B、C、D、E低、中、高3种浓度的平均回收率(n=9)分别为106.1%、102.6%、101.0%、100.0%、101.3%和99.0%。3批样品有关物质测定结果显示,各已知杂质的含量均低于0.2%,其他最大单个杂质的含量均低于0.1%,除杂质Ⅰ外,杂质总量均低于0.5%。结论:本方法可以用于二甲双胍格列本脲片(Ⅱ)中格列本脲的有关物质测定。