一种停滞棒杆菌的高效转化方法

作者：蔡友华; 郑穗平; 谢莹玉; 赵楠楠; 谢学敏; 余宇坚

来源：2020-12-01, 中国, CN202011389348.6.

本发明属于分子生物学技术领域,具体为一种适用于停滞棒杆菌的高效转化方法。其转化方法重点对停滞棒杆菌电转化条件进行系统优化,通过对培养基、电场强度等因素的系统优化,提高转化效率,从而实现对停滞棒杆菌基因组的编辑,达到构建目标工程菌的目的。控制起始光密度值OD 600nm参数为0.29～0.31,将上述种子液转接入优化后的感受态培养基中,在31～32℃,249～252rpm培养,使OD 600nm参数达到0.7～1.1；当OD_(600nm)值为0.7～1.1的感受态细胞,1μg的质粒用量,6min的冰浴时间,10％甘油、1.8KV、5ms、连续电击3次,恢复时间为3h组合的转化效率最高,达到了331cfu/μg。本发明的停滞棒杆菌的高效转化方法操作简单,转化率高。

• 单位
  华南理工大学; 广东肇庆星湖生物科技股份有限公司