摘要

目的葡萄糖-6-磷酸酶催化亚基(G6PC)重组腺病毒, 探究G6PC对肝癌细胞增殖及细胞周期调控的影响。方法构建重组腺病毒AdG6PC,将Huh7细胞及SK-Hep1细胞设为Mock组、AdGFP组、AdG6PC组。采用细胞增殖实验及克隆形成实验观察其对肝癌细胞增殖的影响, transwell实验及划痕实验观察其对肝癌细胞侵袭和迁移的影响, 细胞周期流式分析过表达G6PC对肝癌细胞增殖周期的影响, 蛋白质印迹法检测过表达G6PC对肝癌细胞周期蛋白表达的影响。结果成功构建重组腺病毒AdG6PC。Huh7细胞及SK-Hep1细胞增殖实验示AdG6PC组增殖细胞数明显低于其他2组(P < 0.05), 克隆形成实验显示AdG6PC组的克隆数明显少于其他2组(P < 0.05), 说明肝癌细胞中过表达G6PC可明显抑制肝癌细胞的增殖能力;transwell实验结果表明细胞AdG6PC组细胞迁移数明显少于其他2组(P < 0.05), 划痕实验结果显示AdG6PC组划痕修复率明显低于其他2组(P < 0.05), 说明过表达G6PC可明显抑制肝癌细胞侵袭和迁移。细胞周期流式分析表明, 过表达G6PC显著抑制huh7细胞的G1/S期的转变。蛋白质印迹法结果示过表达G6PC可下调细胞增殖周期相关蛋白的表达。结论 G6PC通过抑制肝癌细胞周期G1/S期转换及相关周期蛋白的表达抑制肝癌细胞增殖, 同时G6PC也可抑制肝癌细胞迁移。