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摘要
目的探讨过表达维A酸受体α(RARα)基因减轻大鼠肾间质纤维化(RIF)的分子机制。方法将40只6周龄雄性SD大鼠按随机数字表法分为4组:假手术组、模型组、阴性对照组、转染组, 每组10只。模型组大鼠分离并双重结扎左侧输尿管;假手术组大鼠不结扎输尿管;转染组和阴性对照组大鼠分别在建模的基础上转染携带过表达RARα基因的腺相关病毒和阴性对照病毒。2周末处死大鼠, 取左肾组织进行病理学检查并计算RIF指数。采用免疫组织化学法检测肾组织Ⅳ型胶原蛋白(Col-Ⅳ)和纤维连接蛋白(FN)的表达, 采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测肾组织RARα、抗增殖蛋白(PHB)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的mRNA和蛋白表达。结果 1.与假手术组相比, 模型组大鼠RIF指数显著升高, 差异有统计学意义(22.81±2.43比2.34±0.55, q=24.94, P<0.05);模型组和阴性对照组大鼠RIF指数相比, 差异无统计学意义(22.81±2.43比22.26±3.43, q=0.67, P>0.05), 而转染组大鼠RIF指数显著降低, 差异有统计学意义(14.06±2.99比22.81±2.43, q=10.66, P<0.05)。2.与假手术组相比, 模型组大鼠肾组织RARα、PHB的mRNA和蛋白表达均显著降低, 而TGF-β1的mRNA及蛋白表达, Col-Ⅳ和FN的表达均显著升高, 差异均有统计学意义(mRNA:0.43±0.17比1.00±0.00, 0.34±0.08比1.00±0.00, 2.97±0.54比1.00±0.00, 均P<0.05;蛋白:0.25±0.10比0.51±0.06, 0.24±0.07比0.58±0.04, 0.59±0.09比0.33±0.06, 16.01±0.87比8.79±0.39, 14.64±0.32比9.36±0.59, 均P<0.05);模型组和阴性对照组大鼠肾组织RARα、PHB、TGF-β1的mRNA及蛋白表达, Col-Ⅳ和FN的表达比较, 差异均无统计学意义(均P>0.05);与模型组相比, 转染组大鼠肾组织RARα、PHB的mRNA和蛋白表达均显著升高, 而TGF-β1的mRNA及蛋白表达、Col-Ⅳ和FN的表达均显著降低, 差异均有统计学意义(mRNA:0.86±0.07比0.43±0.17, 0.89±0.11比0.34±0.08, 1.65±0.28比2.97±0.54, 均P<0.05;蛋白:0.40±0.07比0.25±0.10, 0.45±0.10比0.24±0.07, 0.43±0.08比0.59±0.09, 11.57±0.33比16.01±0.87, 11.67±0.53比14.64±0.32, 均P<0.05)。3.相关性分析:大鼠肾组织RARα蛋白表达与RIF指数、Col-Ⅳ、FN、TGF-β1均呈显著负相关(r=-0.78、-0.78、-0.76、-0.76, 均P<0.05);PHB蛋白表达与RIF指数、Col-Ⅳ、FN、TGF-β1均呈显著负相关(r=-0.87、-0.87、-0.88、-0.75, 均P<0.05);大鼠肾组织RARα蛋白表达与PHB蛋白表达呈显著正相关(r=0.85, P<0.05)。结论在单侧输尿管梗阻所致RIF大鼠中, 过表达RARα可能通过上调PHB的表达而减轻RIF。
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