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摘要
目的:探讨高三尖杉酯碱通过TGF-β_1/Smad信号通路对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(HKF)增殖及凋亡的影响。方法:取第4代对数生长期的HKF细胞,随机分为空白对照组、高三尖杉酯碱组、TGF-β_1组、高三尖杉酯碱+TGF-β_1组,各组细胞给予相应药物孵育后,CCK-8检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,qRT-PCR检测ColⅠ、ColⅢmRNA表达,蛋白印迹法检测TGF-β_1、Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:与对照组比较,高三尖杉酯碱组细胞存活率、侵袭细胞数、划痕愈合百分比显著降低,细胞凋亡率、Bax蛋白表达显著升高,ColⅠ、ColⅢ、TGF-β_1 mRNA及p-Smad2、pSmad3、Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05)。TGF-β_1组上述指标变化趋势与高三尖杉酯碱组相反,除存活率外与对照组比较差异均有统计意义(P<0.05)。高三尖杉酯碱+TGF-β_1组上述指标介于高三尖杉酯碱组和TGF-β_1组之间,与高三尖杉酯碱组及TGF-β_1组比较差异均有统计意义(P<0.05)。结论:高三尖杉酯碱可抑制HKF细胞增殖,诱导凋亡,降低细胞迁移和侵袭能力,其机制与抑制TGF-β_1/Smad信号通路有关。
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