共表达2个独立的抗关节炎分子TNFR-Fc和CTLA4-FasL重组表达系统的建立与鉴定

作者：王芳; 杜芝燕; 于继云; 朱静潆; 张巍

来源：免疫学杂志, 2014, 30(01): 65-74.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20140015

• 类风湿关节炎
• TNFR-Fc
• CTLA4-FasL
• furin裂解位点
• 2A自剪切序列

目的构建能同时独立表达双抗关节炎分子TNFR-Fc和CTLA4-FasL的重组腺相关病毒(AAV)载体,并对蛋白表达进行鉴定。方法应用furin-2A新型剪切策略,构建TNFR-Fc和CTLA4-FasL双融合基因重组AAV载体,体外转染293T细胞,收集转染上清,以ELISA和Western blot等方法检测目的蛋白的表达。结果成功构建双抗炎分子重组表达载体TFCF,在转染细胞上清中检测到目的蛋白TNFR-Fc和CTLA4-FasL的独立共表达。结论获得了可同时拮抗TNF和T细胞的新型双抗关节炎分子共表达系统,为今后动物体内研究奠定了基础。

• 单位
  军事医学科学院基础医学研究所