摘要

目的探讨安石榴苷在白细胞介素(IL)-1β诱导软骨细胞中的作用及其机制。方法不同浓度(10、20、40、80、160 μmol/L)安石榴苷处理软骨细胞, 噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测上清液中环氧化酶(COX)-2、一氧化氮(NO)、基质金属蛋白酶(MMP)-1和MMP-13的表达;实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测MMP-1和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)信使RNA(mRNA)表达的变化;蛋白质印迹法(Western blot)检测核因子-κB(NF-κB)通路相关蛋白表达。多组间比较用单因素方差分析, 两组间比较采用t检验。结果 PUN+IL-1β组COX-2、NO、MMP-1、MMP-13表达水平低于IL-1β组(71.80±4.15、53.80±4.09、33.80±3.03比85.00±4.36, t=4.906、11.676、21.559, P<0.05;207.00±15.89、160.00±10.37、105.80±7.46比278.80±11.82, t=8.107、16.896、27.674, P<0.05;614.20±16.41、445.40±19.01、214.00±13.44比692.80±20.77, t=6.641、19.651、43.288, P<0.05;63.40±4.28、42.40±2.70、31.00±2.24比81.20±5.17, t=5.933、14.879、19.937, P<0.05)。PUN+IL-1β组MMP-1 mRNA相对表达量低于IL-1β组(6.76±0.26、2.63±0.26、1.79±0.22比10.06±0.48, t=13.547、30.472、34.965, P<0.05)。PUN+IL-1β组TIMP-1 mRNA相对表达量高于IL-1β组(0.24±0.03、0.46±0.03、0.80±0.04比0.12±0.03, t=6.399、19.575、32.224, P<0.05)。PUN+IL-1β组p-p65、p-IκB含量低于IL-1β组(1.14±0.03、1.06±0.03、0.97±0.03比1.29±0.03, t=6.272、9.714、13.571, P<0.05;1.30±0.04、1.16±0.03、1.00±0.04比1.41±0.02, t=4.384、11.005、15.367, P<0.05)。结论安石榴苷通过抑制炎性介质COX-2、NO、MMP-1和MMP-13的表达来抑制NF-κB通路的活化, 进而减缓软骨细胞的炎性反应。