摘要
目的探讨长链非编码RNA00238(long intergenic non-coding RNA 00238,Linc00238)在乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制中的调控作用及其可能机制。方法利用LincRNA芯片比较HBV(+)与HBV(-)肝组织样本中LincRNA表达的差异,根据芯片检测结果,最终选择Linc00238为研究对象。Real-time PCR验证Linc00238表达;利用过表达及RNA干扰,检测Linc00238对HBV复制、转录以及表达的影响。利用双荧光素酶报告系统检测Linc00238对HBV启动子活性的影响。结果LincRNA芯片在HBV(+)组织中共发现13条LincRNA表达发生变化,其中2条上调,11条下调,Real-time PCR进一步证实Linc00238在HBV(+)肝组织样本中的表达明显降低,在HBV稳定表达细胞系HepG2. 2. 15、HepAD38及HBV瞬时转染细胞模型中同样发现Linc00238表达下调,提示HBV感染抑制Linc00238表达。过表达Linc00238后,HBV复制及蛋白表达明显降低(P <0. 05),引入sh00238干扰Linc00238表达后,HBV复制及蛋白表达恢复(P> 0. 05);双荧光素酶报告系统显示:HepG2细胞共转染p HBs-luc、p HBx-luc、p HBc-luc及p CDNA-linc00238后的荧光素酶活性与对照组比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论 Linc00238对HBV蛋白及DNA表达具有抑制作用,但不能通过影响HBV启动子活性抑制HBV的表达与复制。
-
单位重庆医科大学附属儿童医院