餐饮及相关食品中病原菌活菌多重实时荧光PCR检测方法的研究与开发

作者：柯振华

来源：生物技术进展, 2020, 10(06): 717-727.

DOI：10.19586/j.2095-2341.2020.0107

• 餐饮食品
• PMA-qPCR
• 病原菌
• 痢疾志贺氏菌
• 金黄色葡萄球菌
• 副溶血性弧菌
• 阴沟肠杆菌
• 产气肠杆菌
• 沙门氏菌
• 蜡样芽胞杆菌
• 大肠埃希氏菌O157∶H7
• 单核细胞增生李斯特氏菌

为了应对餐饮等食品中病原菌快速检测的需求、研究建立病原菌筛查方法,选取痢疾志贺氏菌(Shigella dysenteriae)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)、产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)、沙门氏菌(Salmonella)、蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)、大肠埃希氏菌O157∶H7(Escherichia coli O157∶H7)、单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)等9种病原菌开展多重实时荧光PCR方法研究工作。为了节约预增菌时间与提升检测效率,研发了适用于多种病原菌预增菌的通用型培养基,采取高温裂解法提取菌液核酸,利用PMA染料灭活死亡细菌DNA,筛选出活菌DNA,采用多重实时荧光PCR技术检测目标菌,该方法可在16 h内完成检测,对于目标病原菌的检测低限可达103 CFU·mL-1。

• 单位
  福建省产品质量检验研究院