体外器官培养建立软骨退变模型

作者：丁道芳; 庞坚; 杜国庆; 郭海玲; 秦梦; 曹月龙; 詹红生; 郑昱新

来源：中国矫形外科杂志, 2015, 23(15): 1405-1410.

• 股骨头
• 染色
• 蛋白表达
• 诱导
• 软骨退变

[目的]体外培养大鼠的股骨头并诱导其快速退变,为药物筛选和治疗提供可靠的软骨退变模型。[方法]取2周龄SD幼鼠的股骨头,每只左右股骨头对应为对照组和实验组,分别培养于正常培养基和诱导培养基中(含50ng/ml的TNFa),每隔48 h换一次培养液,至第5 d,取出股骨头,固定于4%多聚甲醛,经过脱钙和脱水,石蜡包埋,切片后经甲苯胺蓝和臧红-固绿染色及细胞免疫荧光检测Ⅱ型胶原、MMP13、Sox9、ADAMTS5等基因的表达。[结果]在诱导培养基中培养5 d的股骨头外缘,相对于正常培养基中培养的股骨头外缘,甲苯胺蓝和臧红染色明显淡染,固绿深染,提示软骨退变。进一步免疫荧光检测软骨标志基因Ⅱ型胶原和Sox9表达减弱,促软骨退变基因MMP13和ADAMTS5表达增强。且经过诱导培养的股骨头的整体大小明显小于正常培养的股骨头。[结论]体外培养大鼠股骨头快速诱导其退变,建立软骨退变的体外模型。

• 单位
  上海市中医药研究院; 上海中医药大学附属曙光医院