血浆外泌体circRNA诊断HCC联合检测模型的建立与验证

作者：孟俊; 王俊青; 费晓春; 顾志冬^*

来源：检验医学, 2022, 37(01): 1-10.

DOI：10.3969/j.issn.1673-8640.2022.01.001

• 环状RNA
• circ＿0000690
• circ＿0001359
• circ＿0000396
• circ＿0000722
• 外泌体
• 甲胎蛋白
• 肝细胞肝癌

目的寻找在肝细胞肝癌(HCC)中差异表达的环状RNA(circRNA)并探讨其对HCC的诊断价值。方法选取行根治性切除术的HCC患者256例(HCC组),其中发现集25例、训练集126例、验证集105例;乙型肝炎相关肝硬化患者100例(肝硬化组),其中训练集50例、验证集50例;健康体检者125名(正常对照组),其中发现集25名、训练集50名、验证集50名。采用沉淀法分离血浆外泌体,采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测外泌体circRNA的表达。采用Logistic回归分析构建HCC诊断模型,并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析模型的诊断效能。结果与正常肝细胞系L02比较,肝癌细胞系Hep3B有102个exo-circRNA表达升高(P<0.05)。与exoRBase数据库比对后,鉴定出4个HCC患者表达量升高的外泌体circRNA(circ0000690、circ0001359、circ0000396和circ0000722)。肝癌组circ0000690、circ0001359和circ0000396表达量显著高于正常对照组(P<0.05),circ0000722表达量2个组之间差异无统计学意义(P>0.05)。无论是训练集还是验证集,肝癌组circ0000690表达量均高于肝硬化组和正常对照组(P<0.001);正常对照组、肝硬化组及肝癌组circ0001359表达量依次升高(P<0.05);肝癌组与肝硬化组之间circ0000396表达量差异无统计学意义(P>0.05),但均高于正常对照组(P<0.05)。建立的联合检测模型为:Logit(P)=1.110×circ0000690+0.822×circ0001359+0.622×circ0000396-4.153。ROC曲线分析结果显示,在训练集中,circ0000690、circ0001359、circ0000396及联合检测模型诊断HCC的曲线下面积(AUC)分别为0.802、0.726、0.621、0.859,诊断早期HCC(巴塞罗那分期0+A期)的AUC分别为0.767、0.698、0.611、0.847,诊断甲胎蛋白(AFP)阴性(<20 ng/mL)HCC的AUC分别为0.810、0.695、0.588、0.894;在验证集中,诊断HCC的AUC分别为0.752、0.663、0.615、0.847,诊断早期HCC的AUC分别为0.763、0.673、0.591、0.845,诊断AFP阴性HCC的AUC分别为0.702、0.670、0.641、0.840。结论基于3种circ RNA(circ0000690、circ0001359和circ0000396)构建的联合检测模型对HCC具有较优异的诊断效能,亦适用于早期HCC和AFP阴性HCC的鉴别诊断。

• 单位
  上海交通大学医学院附属瑞金医院