与猪PD-1和PD-L1互作表位多肽的筛选及其免疫调节功能

作者：岳锋; 周娟娟; 史叶萍; 朱艳平; 孙国鹏; 李鹏; 郭东光; 刘兴友; 王选年^*

来源：中国兽医杂志, 2023, 59(01): 1-7.

• 程序性死亡因子1
• 表位多肽
• 外周血单个核细胞

本试验旨在筛选和鉴定与猪程序性死亡因子1(PD-1)及其配体(PD-L1)相互作用的表位多肽，为阻断猪PD-1/PD-Ls通路逆转机体的免疫功能提供新策略。根据已解析人与鼠的PD-1与PD-L1相互作用的关键氨基酸位点信息，分析猪PD-1与PD-L1蛋白相互结合的关键氨基酸位点，在关键氨基酸位点处设计系列表位多肽，固相合成法合成表位多肽；分离自然感染猪圆环病毒2型(PCV2)仔猪的外周血单个核细胞(PBMC),检测表位多肽与猪重组蛋白PD-1、PD-L1和PBMC的结合能力，选取能结合猪PD-L1和PBMC的表位多肽pPD-15,检测其对猪PBMC增殖的影响，分析其作为佐剂免疫后对小鼠猪瘟病毒(CSFV)抗体水平的影响，最后，高效液质联用色谱法(HPLC-MS)检测表位多肽pPD-15的纯度和氨基酸序列正确性。结果显示，表位多肽pPD-15能结合猪PD-L1和PBMC;增殖试验显示，pPD-15组M1的平均荧光强度(74.20%)比空白对照组M1的平均荧光强度(4.37%)提高了69.83%,表明表位多肽pPD-15可促进猪PBMC的增殖；动物免疫试验显示，pPD-15作为佐剂可以提高CSFV抗体水平；HPLC-MS结果显示，合成的表位多肽pPD-15纯度高，氨基酸序列正确。本试验证实，表位多肽pPD-15具有提高体内外免疫力的能力，为研制新型免疫调节佐剂提供了科学依据。

• 单位
  新乡学院