靶向垂体特异转录因子-1的小干扰RNA对大鼠生长激素垂体腺瘤GH3细胞生物学行为的影响

作者：范月超; 张慧; 李锦晓; 梅鹏金; 郑骏年; 雷霆

来源：中华实验外科杂志, 2013, 30(08): 1680-1682.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2013.08.039

• 垂体腺瘤
• 小干扰RNA
• 生物学行为

目的观察小干扰RNA(siRNA)抑制大鼠垂体生长激素腺瘤细胞(GH3)中垂体特异转录因子-1(Pit-1)的基因表达对其生物学行为的影响。方法设计合成针对Pit-1基因的siRNA,经脂质体包裹转染GH3细胞。采用Western blot、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定经siRNA转染24 h后;Pit-1蛋白和Pit-1 mRNA表达;用细胞计数试剂盒(CCK-8)细胞增殖-毒性检测法检测细胞生长增殖的变化;用流式细胞仪检测细胞凋亡的改变;制备Transwell小室测定GH3细胞体外侵袭能力的变化。结果 siRNA显著地抑制Pit-1蛋白和Pit-1 mRNA的表达水平,分别降低58.18%和75.82%;CCK-8法结果显示siRNA组细胞增长率明显低于与阴性对照组;流式细胞仪分析显示,siRNA组细胞凋亡率[(9.250 00±0.996 95)%]较阴性对照组[(2.893 30±0.665 16)%]增加;,siRNA组穿过Matrigel胶及滤膜的细胞数[(92.91±53.25)个],与阴性对照组[(7.50±7.95)个]比较侵袭力明显减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Pit-1 siRNA能够有效地抑制GH3细胞的生长、促进其凋亡,降低侵袭力。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院; 徐州医学院附属医院