摘要
目的研究microRNA-1(miR-1)在急性心肌梗死(AMI)大鼠中的表达及对心肌H9C2细胞凋亡的影响。方法将30只8~10周龄大鼠随机分为正常对照组、假手术组和模型组,每组10只。模型组采用开胸结扎冠状动脉(冠脉)的方法建立急性心肌梗死大鼠模型,假手术组大鼠仅开胸不结扎冠脉,正常对照组大鼠不做任何处理。通过缺氧、无血清培养构建缺血H9C2细胞模型,将H9C2细胞分为三组:对照组、阴性组和抑制组,对照组细胞不做任何处理,阴性组细胞转染NC,抑制组细胞转染miR-1 inhibitor。荧光定量PCR(qPCR)检测大鼠缺血心肌组织和H9C2细胞中miR-1的表达量,流式细胞术检测H9C2细胞凋亡率,免疫印迹试验(Western Blot)检测H9C2细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、活化的Caspase-3(Cleaved Caspase-3)蛋白表达量。结果正常对照组和假手术组大鼠心肌组织中miR-1表达量差异无统计学意义(P>0.05);与正常对照组和假手术组大鼠相比,模型组鼠心肌组织中miR-1的表达量显著升高(P<0.05);对照组和阴性组H9C2细胞中miR-1表达量、细胞凋亡率和细胞中Cleaved Caspase-3蛋白表达水平差异均无统计学意义(P>0.05);与对照组和阴性组相比,抑制组H9C2细胞中miR-1的表达量显著下调(P<0.05),细胞凋亡率和细胞中Cleaved Caspase-3蛋白表达水平水平显著降低(P<0.05)。结论 miR-1在大鼠心肌梗死模型中的表达量增加,具有促进心肌细胞凋亡的作用。
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单位三门峡市中心医院