单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定

作者：王志杰; 张华; 陈学良; 金文睿; 丛雅琴; 韩波; 谷燕

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2005, 21(1): 72-75.

DOI：10.3321/j.issn:1007-8738.2005.01.021

• CD8+T细胞
• γ-干扰素
• 毛细管电泳免疫分析
• 激光诱导荧光检测

目的: 建立一种新的单细胞内IFN-γ的检测方法毛细管电泳免疫分析激光诱导荧光法(CEIA-LIF).方法: 选2例重型再障(sever aplastic anemia, SAA)患者及1例正常人, 用免疫磁珠法分离纯化外周血CD8+ T细胞.将其与毛地黄皂苷反应15 min, 再与FITC-抗IFN-γ单抗(mAb)反应20 min.用CEIA-LIF法进行单个细胞的连续检测, 并用倒置显微镜及激光扫描共聚焦荧光显微镜等证实本法的可行性.结果: 纯化的CD8+ T细胞内的IFN-γ, 是在不溶膜的情况下得到全部检测.2例SAA患者外周血单个CD8+ T细胞内IFN-γ的含量, 分别为(151.53±28.92)zmol和(223.72±45.23)zmol, 高出正常对照(47.47±17.97)zmol约3～4倍(P<0.01).结论: CEIA-LIF法对单个CD8+ T细胞内IFN-γ含量的测定是可行的, 有望用于临床检测.

• 单位
  齐鲁医院; 山东大学; 微生物技术国家重点实验室; 生命科学学院