基于窄内径毛细管-LIF检测系统的miR-221-3p超小体积无扩增检测

作者：高潇潇; 王亮霞; 常亚冉; 张文美^*; 汪夏燕

来源：武汉大学学报(理学版), 2022, 68(04): 383-389.

DOI：10.14188/j.1671-8836.2022.0084

• 窄内径毛细管
• 激光诱导荧光
• 分子信标
• 微小核糖核酸

微小核糖核酸(microRNA,miRNA)是多种疾病和生物过程的一类标志物，无扩增的miRNA检测具有保真度高以及成本低的特点。本研究采用内径为1.06μm的窄内径毛细管作为检测通道，耦联高灵敏的激光诱导荧光(LIF)检测系统用于微小核糖核酸221-3p(miR-221-3p)的超小体积无扩增检测。以miR-221-3p为靶标设计锁核酸(LNA)修饰的分子信标(MB)探针LNA/MB-221，该探针在MgCl2溶液浓度大于3 mmol/L时背景信号较弱，背景干扰更小；杂交温度为65℃时杂交样品的荧光信号更强。探针与靶标miR-221-3p的杂交样品在低浓度范围(1～10 nmol/L)内线性关系较好，样品消耗仅850fL时检出限达到8.5×10-22mol(约508个分子)。该方法也可实现人胚肺成纤维细胞HFL-1和非小细胞肺癌细胞A549的无扩增检测及相对表达量分析。

• 单位
  北京工业大学