胰岛β细胞Metrnl基因敲除小鼠的鉴定及初步表型分析

作者：扈腊英; 黄亚莉; 刘露; 王贵芳; 常雪冰; 宋铃榆; 周宇霞^*; 郭兵^*

来源：中国病理生理杂志, 2023, 39(11): 2034-2043.

• 糖尿病
• Metrnl蛋白
• Cre-LoxP系统
• 糖耐量
• 葡萄糖刺激的胰岛素分泌
• β细胞

目的：基于Cre-LoxP重组酶系统，构建胰岛β细胞Metrnl基因敲除小鼠(Metrnl-KO)，为进一步探究Metrnl基因在糖尿病疾病中的发病机制提供动物模型。方法：将雌雄基因型均为Metrnlfloxp/+的小鼠合笼杂交，筛选出基因型为Metrnlfloxp/floxp的小鼠，将该基因型小鼠与胰岛β细胞特异性表达Cre重组酶(Ins-2)工具鼠进行杂交繁育，获得基因型为Metrnlfloxp/+;Cre+的小鼠；再将Metrnlfloxp/+；Cre+小鼠与Metrnlfloxp/floxp小鼠杂交获得Metrnlfloxp/floxp;Cre+小鼠，基因型为Metrnlfloxp/floxp;Cre+的小鼠即为目的鼠。采用RT-q PCR检测Metrnl和胰岛素(Ins-1和Ins-2)的m RNA水平；免疫组化和免疫荧光染色观察胰岛组织Metrnl和胰岛素的蛋白表达情况；记录小鼠体重，同时测定小鼠糖耐量和胰岛素耐量。结果：RT-q PCR和免疫组化结果均显示Metrnl-KO小鼠胰岛组织中Metrnl的m RNA和蛋白水平显著低于对照鼠(P<0.01);Metrnl-KO小鼠与对照鼠相比，体重无明显变化，但糖耐量受损且对胰岛素敏感性降低(P<0.05);RTq PCR结果显示胰岛组织中Ins-1和Ins-2的m RNA水平显著下调(P<0.01)，且免疫荧光结果提示胰岛组织中胰岛素表达低于对照鼠(P<0.05)；葡萄糖刺激的胰岛素分泌实验结果显示，Metrnl敲除可引起小鼠胰岛素分泌减少(P<0.05)。结论：我们构建并验证了条件性胰岛β细胞Metrnl基因敲除小鼠模型，还发现Metrnl的特异性敲除影响了小鼠的糖耐量和胰岛素耐受性，同时Metrnl敲除引起小鼠胰岛素分泌能力受损，为进一步研究Metrnl在糖尿病发生发展中的具体机制提供了研究基础。

• 单位
  贵州医科大学