人纤维介素基因真核表达载体的构建及表达

作者：李黎; 朱传龙; 宁琴

来源：医学研究生学报, 2006, (03): 199-201+300.

DOI：10.16571/j.cnki.1008-8199.2006.03.003

• 纤维介素基因
• 基因表达
• 病毒性肝炎

目的:构建人纤维介素(hfgl2)基因的真核表达载体,并在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中表达。方法:提取人外周血单个核细胞的总RNA,逆转录得到cDNA,以其为模板,PCR扩增hfgl2 cDNA片段,将目的片段通过T载体过渡克隆至表达载体pcDNA3.1,将重组质粒转染CHO细胞并制作细胞爬片,对爬片进行免疫组化染色,显微镜下观察并摄片。结果:扩增出1.3 kb的目的片段,并将其克隆至pcDNA3.1,经酶切鉴定和测序鉴定无误;重组质粒转染CHO细胞,细胞爬片免疫组化染色可见细胞质中存在明显的阳性棕染。结论:成功构建hfgl2基因的真核表达载体,为进一步探讨其功能学和干预研究奠定了基础。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院