大黄素诱导自噬改善顺铂导致肾小管细胞损伤机制探索

作者：刘红; 孙伟; 顾刘宝

来源：世界科学技术-中医药现代化, 2017, 19(03): 529-535.

DOI：10.11842/wst.2017.03.023

• 大黄素
• 顺铂
• 自噬
• 凋亡
• 肾小管上皮细胞

目的:观察大黄素对顺铂所致的肾小管上皮细胞(NRK-52E)损伤的影响,探讨其可能分子调节机制。方法:观察大黄素对顺铂所致NRK-52E细胞形态学改变的影响;采用Western Blot方法检测顺铂单独处理和加入大黄素共同处理细胞后,凋亡相关蛋白Caspase-3和cleaved Caspase-3的表达情况;用大黄素干预细胞不同的时间点,观察微管相关蛋白1轻链3(LC3)II/I的表达和pmRFP-LC3质粒转染细胞后荧光颗粒的变化情况,同时观察雷帕霉素处理细胞不同时间点后LC3-II/I的表达情况及其对顺铂环境下细胞形态学改变的影响,并观察大黄素对自噬上游通路AMPK的活化和m TOR信号的影响。结果:顺铂可以诱导NRK-52E细胞出现形态学改变,大黄素能够改善顺铂导致的变化。另外,大黄素干预可以下调顺铂导致的cleaved Caspase-3蛋白表达的增多;大黄素处理细胞不同时间点LC3-II/LC3-I的比值明显上升,pmRFP-LC3转染观察到大黄素处理细胞后自噬颗粒明显增多。同时雷帕霉素处理细胞后LC3-II/LC3-I的比值明显上升,其与顺铂共同干预能明显改善顺铂诱导的细胞凋亡;大黄素干预时间的延长,p-m TOR蛋白表达明显下调,p-AMPK的表达明显上调。结论:大黄素可以改善顺铂诱导的NRK-52E细胞凋亡,其作用机制可能是通过调节AMPK/m TOR信号通路诱导自噬来发挥肾保护作用。

• 单位
  武汉市第一医院; 江苏省老年医学研究所; 南京中医药大学; 江苏省中医院; 江苏省省级机关医院