HPLC法测定tremor大鼠脑组织中谷氨酸和GABA含量

作者：俞军龄; 陈再兴; 毛小元; 孟秀君; 郭凤; 刘睿; 吴坤灿; 谢妮; 蔡际群

来源：中国药理学通报, 2009, (11): 1530-1533.

DOI：10.3321/j.issn:1001-1978.2009.11.031

• 谷氨酸
• γ -氨基丁酸
• OPA柱前衍生化
• 反相高效液相色谱法
• tremor大鼠
• Wistar大鼠
• 癫痫

目的建立测定tremor大鼠(tm)脑内海马组织中GLU及GABA浓度的高效液相色谱(HPLC)方法。方法冰上剥离13wk的tm/Wistar大鼠海马组织,低温匀浆处理,利用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生HPLC法结合荧光检测器测定GLU和GABA的含量。0.1mol·L-1醋酸钾和甲醇进行二元梯度洗脱,峰面积定量。结果GLU的线性方程为Y^=1E+06X(r2=0.9937),线性范围为0.15～5.88mg·L-1,具有良好的线性关系,在0.74、1.47、3.68mg.L-13个浓度下样本回收率分别为97.7%、98.9%、100.5%;样品中GLU日内变异系数为3.8%,隔日测定后,日间变异系数为5.9%;GABA的线性方程为Y^=4E+06X(r2=0.998),线性范围为0.10～2.15mg·L-1,具有良好的线性关系,在0.2、0.5、1.0mg·L-13个浓度下样本回收率分别为98.3%、101.0%、102.7%;样品GABA日内变异系数为2.3%,隔日测定后,日间变异系数为3.9%。结论该方法较简便、快速且干扰相对较小,满足测定要求,可用于氨基酸的含量测定研究。

• 单位
  中国医科大学附属第四医院; 中国医科大学