摘要
目的:研究EphrinB2对TNF-α作用下的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)与牙髓干细胞(hDPSCs)共培养体系体外成血管的影响。方法:按1∶5比例共培养hDPSCs与HUVECs, TNF-α(0~80 ng/mL)处理共培养细胞,检测EphrinbB2蛋白表达水平。用特异性沉默EphrinB2基因的慢病毒载体转导hDPSCs,经不同浓度TNF-α处理后,在共培养第9、12小时检测小管形成情况及EphrinB2通路蛋白表达。结果:Western blot结果显示20 ng/mL的TNF-α显著促进共培养体系EphrinB2的表达(P<0.001)。体外小管形成实验结果显示在第12小时,HUVECs+EphrinB2-shRNA-hDPSCs组小管相对分支点数较少(P<0.01),相对长度较短(P<0.01)。Western blot结果显示EphrinB2和ephb4表达在TNF-α+HUVECs+hDPSCs组最高(P<0.01),而在HUVECs+EphrinB2-shRNA-hDPSCs组表达量最低(P<0.01)。结论:TNF-α可以通过激活EphrinB2/ephb4通路,逆转沉默hDPSCs的EphrinB2引起的小管裂解,从而促进小管形成。
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单位哈尔滨医科大学; 哈尔滨医科大学附属第一医院